免疫印迹技术-检查项目-大众养生网

热门搜索：
营养饮食 食物相克 食物热量

免疫印迹技术

基本信息

  • 专科分类： 生长发育检查
  • 检查分类： 生化检查
  • 适用性别： 男女均适用
  • 是否空腹： 　非空腹
  • 手术参考价： 120元
  • 科　室： 生长发育检查

免疫印迹技术检查简介

免疫印迹法是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测,具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。

免疫印迹技术检查过程

(一)蛋白质样品获得：细菌诱导表达后，可通过电泳上样缓冲液直接裂解细胞，真核细胞加匀浆缓冲液，机械或超声波室温匀浆0.5-1min。然后4℃，13,000g离心15min。取上清液作为样品。

(二)电泳：制备电泳凝胶，进行SDS-PAGE。

(三)转移：(半干式转移)

1、电泳结束后将胶条割至合适大小，用转膜缓冲液平衡，5min×3次。

2、膜处理：预先裁好与胶条同样大小的滤纸和NC膜，浸入转膜缓冲液中10min。

3、转膜：转膜装置从下至上依次按阳极碳板、24层滤纸、NC膜、凝胶、24层滤纸、阴极碳板的顺序放好，滤纸、凝胶、NC膜精确对齐，每一步去除气泡，上压500g重物，将碳板上多余的液体吸干。接通电源,恒流1mA/cm2，转移1.5hr。转移结束后，断开电源将膜取出,割取待测膜条做免疫印迹。将有蛋白标准的条带染色，放入膜染色液中50s后，在50%甲醇中多次脱色，至背景清晰，然后用双蒸水洗，风干夹于两层滤纸中保存，留与显色结果作对比。

(四)免疫反应：

1、用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

2、加入包被液，平稳摇动，室温2hr。

3、弃包被液，用0.01MPBS洗膜，5min×3次。

4、加入一抗(按合适稀释比例用0.01MPBS稀释，液体必须覆盖膜的全部)，4℃放置12hr以上。阴性对照，以1%BSA取代一抗，其余步骤与实验组相同。

5、弃一抗和1%BSA，用0.01MPBS分别洗膜，5min×4次。

6、加入辣根过氧化物酶偶联的二抗(按合适稀释比例用0.01MPBS稀释)，平稳摇动，室温2hr。

7、弃二抗，用0.01MPBS洗膜，5min×4次。

8、加入显色液，避光显色至出现条带时放入双蒸水中终止反应。

相关医生

更多>

  • 李秀莲,主任医师
    李秀莲 主任医师
    未开通
    青海省妇女儿童医院 儿科

    擅长疾病： 新生儿疾病的诊断、治疗与护理。

  • 卢秀英,主任医师
    卢秀英 主任医师
    未开通
    青海省妇女儿童医院 急救科

    擅长疾病： 危重病的救治。

  • 席时华,主任医师
    席时华 主任医师
    未开通
    乌鲁木齐市友谊医院 眼底

    擅长疾病： 青光眼的早期诊断及难治性青光眼的治疗，眼底疾病及小儿弱视诊治

  • 李晶,主任医师
    李晶 主任医师
    未开通
    乌鲁木齐市友谊医院 眼底

    擅长疾病： 眼科常见病、多发病的诊断、治疗，特别是对准分子激光治疗近视、青光眼、泪道疾病及眼外伤的治疗积累了丰富的临床经验

相关医院

专家推荐

  • 李秀莲

    李秀莲 新生儿疾病的诊断、治疗与护理。

    擅长：主任医师

    著名中医肿瘤学家及中西医结合临床肿瘤学家，现为广州中医药大学第一附属医院副院长，医学博士、教授、博

  • 卢秀英

    卢秀英 危重病的救治。

    擅长：主任医师

    从事儿内、急救专业近四十年，具有丰富的危重症及疑难杂症抢救治疗经验。特别擅长各种休克、中毒、抽搐等

  • 席时华

    席时华 青光眼的早期诊断及难治性青光眼的治疗，眼底疾病及小儿弱视诊治

    擅长：主任医师

    从事眼科临床工作40余年，具有极丰富的临床经验及诊治疑难眼病的能力，尤其擅长青光眼的早期诊断及难治

  • 李晶

    李晶 眼科常见病、多发病的诊断、治疗，特别是对准分子激光治疗近视、青光眼、泪道疾病及眼外伤的治疗积累了丰富的临床经验

    擅长：主任医师

    李晶，女，1962年12月生，汉族，陕西人。1985年毕业于新疆医学院医疗系，学士学位。毕业后分配

  • 热西提

    热西提 内科心血管疾病的诊断与治疗

    擅长：主任医师

    1965年毕业于新疆医学院临床医疗学，擅长内科心血管疾病的诊断与治疗，曾获自治区优秀专家称号。全国

疾病科室

更多 >

推荐文章

查看更多>

推荐问答

问减肥期间吃红甜椒会胖吗？
答

红甜椒作为一种低热量、高纤维的蔬菜，其含有丰富的维生素C和抗氧化物质，对于减肥期间的人群来说，适量食用红甜椒不仅不会导致体重增加，反而有助于提高饱腹感，减少对高热量食物的摄入。同时，红甜椒中的营养成分还有助于促进新陈代谢，对减肥有一定的辅助作用。因此，在减肥期间，适量食用红甜椒是有益的，不会导致体重增加。建议将红甜椒作为日常饮食的一部分，与其他健康食物搭配，形成均衡的饮食结构。

问减肥期间吃了一包干脆面怎么办？
答

作为医生，我建议您在减肥期间应尽量避免摄入高热量、高脂肪的食物，如干脆面。如果不慎摄入，不必过于焦虑，但应认识到这可能对您的减肥计划产生一定影响。为了减少摄入的热量，您可以在接下来的饮食中适当减少碳水化合物和油脂的摄入，增加蔬菜和蛋白质的比例，以平衡整体热量摄入。同时，增加适量的运动可以帮助消耗多余的热量，促进新陈代谢。请继续保持健康的生活方式，避免过度摄入高热量食物，以实现长期稳定的减肥效果。

问减肥期间喝八宝粥会胖吗？
答

减肥期间饮用八宝粥是否会导致体重增加，取决于八宝粥的营养成分和摄入量。八宝粥通常由多种谷物、豆类和干果等食材制成，这些食材富含膳食纤维、维生素和矿物质，有助于维持健康的饮食结构。然而，八宝粥中的糖分和热量也不容忽视，尤其是如果添加了过多的糖或高热量的食材。因此，适量饮用八宝粥，避免过量摄入糖分和高热量食材，可以作为减肥期间的健康饮食选择。同时，应注意整体饮食的均衡和控制总热量摄入，配合适当的运动，以达到减肥效果。

问减肥期间可以吃橘子吗？
答

在减肥期间，适量食用橘子是可以的。橘子富含维生素C、钾、纤维等营养成分，有助于增强免疫力、维持电解质平衡和促进肠道蠕动。然而，橘子含有一定的糖分，过量食用可能会导致热量摄入过多，不利于减肥。因此，建议在减肥期间适量食用橘子，同时注意整体饮食的平衡和热量控制。可以将橘子作为健康零食，与其他低糖水果搭配，以满足口感和营养需求，同时避免过量摄入糖分。

问减肥期间可以吃烧鸭吗？
答

在减肥期间，适量食用烧鸭是可以的，但需注意控制摄入量。烧鸭作为一种高蛋白、低脂肪的肉类食品，可以为身体提供必要的营养。然而，烧鸭的烹饪过程中通常会加入较多的油脂和调料，这会增加食物的热量。因此，在减肥期间食用烧鸭时，应选择较为清淡的烹饪方式，如蒸或烤，避免油炸或重口味的烹饪方法，并注意整体饮食的均衡，搭配足够的蔬菜和适量的碳水化合物，以确保营养全面且控制总热量摄入。

问减肥期间可以吃瘦肉丸吗？
答

在减肥期间，适量摄入瘦肉丸是可以的。瘦肉丸富含优质蛋白质，有助于肌肉的修复和增长，同时蛋白质的热效应较高，可以增加能量消耗。此外，瘦肉丸中的脂肪含量相对较低，有助于控制总热量摄入。然而，减肥期间应注重营养均衡，不应过度依赖单一食物。建议将瘦肉丸作为蛋白质来源之一，搭配蔬菜、水果和全谷物等食物，形成多样化的饮食结构。同时，控制总热量摄入，结合适量运动，以达到健康减肥的目的。

查看更多>